Bu kaydın yasal hükümlere uygun olmadığını düşünüyorsanız lütfen sayfa sonundaki Hata Bildir bağlantısını takip ederek bildirimde bulununuz. Kayıtlar ilgili üniversite yöneticileri tarafından eklenmektedir. Nadiren de olsa kayıtlarla ilgili hatalar oluşabilmektedir. MİTOS internet üzerindeki herhangi bir ödev sitesi değildir!

Köpek mezenkimal kök hücrelerinin in-vitro nörojenik farklılaştırılması ve özelliklerinin incelenmesi

Diğer Başlık: In-vitro neurogenic differentiation of canne mesenchymal Stem cells and evaluation of properties

Oluşturulma Tarihi: 2017

Niteleme Bilgileri

Tür: Tez

Alt Tür: Doktora

Yayınlanma Durumu: Yayınlanmış

Dosya Biçimi: PDF

Dil: Türkçe

Konu(lar): BİLİM, Kimya,

Yazar(lar): KURT, Zeynep (Yazar),

Emeği Geçen(ler): ELÇİN, Yaşar Murat (Tez Danışmanı),


Yayınlayan: Ankara Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Kimya Anabilim Dalı Yayın Yeri: Ankara Yayın Tarihi: 2017 Yayınlandığı Sayfalar: 81 s.


Dosya:
file show file
Görüntüle
download file
Kaydet

Anahtar Kelimeler

Mezenkimal kök hücre, Hücre kültürü, Nörojenik farklılaşma,Nöroküre, Mesenchymal stem cell, Cell culture, Neurogenic differentiation,Neurosphere.


Özet

Bu çalışmada köpek kemik iliği mezenkimal kök hücrelerin izolasyonu, kültürü,karakterizasyonu ve in-vitro ortamda nörojenik nesile farklılaştırılması incelenmiştir.Köpeğin iliak krestinden toplanan köpek kemik iliği mezenkimal kök hücreleri (Kİ-MKH) hücre kültürü ortamında çoğaltıldı. Çoğaltılan hücrelerin karakterizasyonu içinkoloni oluşturma potansiyelleri, empedansa dayalı hücre analiz sistemi ile hücrebüyüme eğrisi, çoklu soy ve akım sitometri analizleri gerçekleştirildi. Bu aşamadansonra köpek Kİ-MKH’leri, geliştirilen iki-aşamalı nörojenik farklılaştırma protokolünetâbi tutuldu. Nöroküre oluşturmak amacıyla yapılan ilk indüksiyon aşamasında hücreler;epidermal büyüme faktörü (EGF) ve bazik fibroblast büyüme faktörü (bFGF) içerennörobazal vasatta kültüre alındı. Üç gün süren ilk indüksiyon aşamasından sonra eldeedilen nöroküreler ışık mikroskobunda görüntülendi. Nöroküre oluşum aşamasındansonra nörojenik farklılaşmanın ikinci basamağı olan nöron-benzeri hücre oluşumaşamasına geçildi. Dağıtılan nöroküreler, sinir büyüme faktörü (NGF), beyin-kaynaklınörotrofik faktörü (BDNF) içeren nörobazal vasatta altı gün kültüre alındı. İkinciindüksiyon aşaması sonunda nörojenik nesile farklılaştırılmış köpek Kİ-MKH’lerininimmunhistokimya boyamaları yapıldı. İn-vitro ortamda, köpek kemik iliğinden izoleedilen hücrelerin mezenkimal karakterde olduğu, nöronal ve glial işaretçileri ifade edenhücrelere farklılaşabildiği ve bu hücrelerin ise gelecekte sinir doku hasarlarınıntedavisinde fonksiyonel yenilenme için kullanılabilme potansiyeline sahip olduğugözlendi.

Abstract

In this study, we have investigated the mesenchymal properties and neurogenicdifferentiation potentials of cultured canine bone marrow stem cells. Caninemesenchymal stem cells isolated from the iliac crest of canine were proliferated understerile conditions. The mesenchymal properties of the cultured cells were confirmedusing coloniy forming unit, impedance-based cell analysis system, lineage and flowcytometry analysis. At passage 2; BM-MSCs were induced into the neurogenic lineageby a two-step differentiation protocol. Cells were placed in tissue culture flasks coatedwith poly(hydroxyethylmethacrylate) and cultured in the B-27 and N-2 containingneurobasal medium. At the second step, the acquired neurospheres were disaggregatedand the cell suspension was plated in tissue culture flasks which were coated with poly-L-ornithine. The neurosphere-derived cell suspension was then cultured for six days inthe neurobasal medium supplemented with nerve growth factor (NGF) and brainderivedneurotrophic factor (BDNF) for further induction into the neurogenic lineage.For determination of neurogenic differentiation of the mesenchymal stem cells, primaryantibodies were used. The findings indicated that mesenchymal stem cells differentiateinto cells expressing neuronal and glial markers in vitro and some mesenchymal stemcells exhibit neural potential.


İçindekiler



Açıklamalar



Haklar



Notlar



Kaynakça


Atıf Yapanlar

Gözat Sayfasına Dön

 

Sosyal Medya ve Araçlar

İstatistikler

  • Kayıt
    • Bu ay: 0
    • Toplam: 31537
  • Online
    • Ziyaretçi: 149
    • Üye: 0
    • Toplam: 149

Detaylı İstatistikler